Preview

Офтальмология

Расширенный поиск

Разработка и экспериментальное обоснование эффективности методики локального субретинального введения ксеногенных стволовых клеток меченых магнитными частицами

https://doi.org/10.18008/1816-5095-2014-3-45-51

Полный текст:

Аннотация

Цель — разработать методику локального субретинального введения ксеногенных стволовых клеток меченых магнитными частицами, и экспериментально обосновать ее эффективность.

Материал и методы. В работе использована линия стволовых клеток НЕК-293 GFP меченых магнитными частицами. Исследование проведено на 84 глазах 42 кроликов породы шиншилла в возрасте 6 месяцев весом от 2,5 до 3,5 кг. Все правые глаза были опытными (42 глаза), левые (42 глаза) — контрольными. В опытной группе к склере подшивали комплекс полимерного эластичного магнитного имплантата (ПЭМИ) с лазерным зондом, проводили срединную витрэктомию и с помощью специально разработанного дозатора вводили HEK-293 GFP под сетчатку. В группе контроля ПЭМИ с лазерным зондом не фиксировали. В сроки 1, 3, 5, 7, 14 суток и 1 месяц проводили биомикроскопию, офтальмоскопию глазного дна с фотографированием, ультразвуковое офтальмосканирование, оптическую когерентную томографию (ОКТ), компьютерную томографию (КТ), морфологическое исследование (крио-гистологические срезы).

Результаты. По данным биомикроскопии в сроки наблюдения до 3 суток имела место инъекция сосудов в зоне операции. По данным офтальмоскопии, ультразвукового исследования в 1‑е сутки визуализировалась локальная отслойка сетчатки в зоне введения клеток, которая не наблюдалась в дальнейшие сроки наблюдениями. По данным КТ подтверждено место расположения ПЭМИ. По данным морфологического исследования доказано, что в опытной группе клетки располагаются в субретинальном пространстве в сроки до 14 суток, а в группе контроля — только до 3 суток.

Выводы. Разработанный хирургический способ дает возможность контролировать введение клеток в субретинальное пространство, снижает риск повреждения тканей и выхода клеток в полость стекловидного тела. Предложенная методика позволяет осуществить фиксацию клеточного материала в месте его локального введения и дает возможность прогнозирования движение клеток.

Об авторах

Ю. А. Белый
Калужский филиал ФГ БУ «МНТ К «Микрохирургия глаза» им. акад. С. Н . Федорова Министерства здравоохранения Российской федерации
Россия


А. В. Терещенко
Калужский филиал ФГ БУ «МНТ К «Микрохирургия глаза» им. акад. С. Н . Федорова Министерства здравоохранения Российской федерации
Россия


С. А. Миргородская
ФГ БУ «МНТ К «Микрохирургия глаза» им. акад. С. Н . Федорова» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Россия


А. А. Темнов
Научно-исследовательский институт скорой помощи им. Н. В. Склифосовского
Россия


А. В. Семенов
ФГ БУ «МНТ К «Микрохирургия глаза» им. акад. С. Н . Федорова» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Россия


А. В. Ревищин
Институт Биологии гена Российской Академии Наук
Россия


Г. В. Павлова
Институт Биологии гена Российской Академии Наук
Россия


Н. Н. Куст
Институт Биологии гена Российской Академии Наук
Россия


Список литературы

1. Ehnert S., Glanemann M., Schmitt A., Vogt S., Shanny N., Nussler N. C., Stockle U., Nussler A. The possible use of stem cells in regenerative medicine: dream or reality? Langenbecks Arch Surg. 2009; 394: 985‑997.

2. Onishhenko N. A., Krasheninnikov M. E. [Cell transplantation — a promising direction of regenerative medicine]. Kletochnaja transplantacija — perspektivnoe napravlenie regeneracionnoj mediciny. Moscow, 2009. (in Russ.).

3. Royo P., Quay W. Retinal transplantation from fetal to maternal mammalian eye. Growh. 1959; 23: 313‑336.

4. Chacko D. M., Das A. V., Zhao X., James J., Bhattacharya S., Ahmad I. Transplantation of ocular stem cells: the role of injury in incorporation and differentiation of grafted cells in the retina. Vision Res.2003; 43 (8): 937‑946.

5. Mears A., Kondo M., Swain P. et al. Nrl is required for rod photoreceptor development. Nature Genet. 2001; 29: 447‑452.

6. Silvermann M. S., Hughes S. E. Photoreceptor transplantation in inherited and environmentally induced retinal degeneration: anatomy, immunohistochemistry and function. Prog. Clin. Biol. Res. 1989; 314: 687‑704.

7. Takahashi M., Palmer T. D., Takahashi J., Gage F. H. Widespread integration and survival of adult-derived neural progenitor cells in the developing optic retina. Mol. Cell Neurosci. 1998; 12 (6): 340‑348.

8. Takhchidy Kh. P., Gavrilova N. A., Komova O. Yu. et al. [Influence of stem / progenitor cells on functional status and level of degenerative changes of the retina in Campbell rats]. Vlijanie stvolovyh / progenitornyh kletok na funkcional’noe sostojanie i stepen’ vyrazhennosti degenerativnyh izmenenij setchatki u krys linii Campbell. [Ophthalmosurgery], Oftal’mohirurgija 2010;3:33‑38. (in Russ.).

9. Beljakovskij P. V., Poznjak N. I., Lobanok E. S. [Application of embryonic stem cells and stem cell growth factors (stem cell factor, lif) in toxic damage of the optic nerve in rabbits].. Primenenie jembrional’nyh stvolovyh kletok i faktorov rosta stvolovyh kletok (stem cell factor, lif) pri toksicheskom porazhenii zritel’nogo erva u krolikov. [Magazine Prescription], Recept 2009; 12: 156‑161. (in Russ.).

10. Romashchenko A. D., Kovalev A. V. [A method for treating optic atrophy by autologous stem cell transplantation]. Sposob lechenija atrofii zritel’nogo nerva posredstvom transplantacii autologichnyh stvolovyh kletok. Oficial’nyj bjulleten’ Rossijskogo agentstva po patentam i tovarnym znakam Patent 242895. [Official bulletin of the Russian Agency for Patents and Trademarks], 2009; 26: 8. (in Russ.).

11. Arbab A. S., Jordan E. K., Wilson L. B., Yocum G. T., Lewis B. K., Frank J. A. In vivo trafficking and targeted delivery of magnetically labeled stem cells. Hum Gene Ther. 2004; 15 (4): 351‑360.

12. Song M., Kim Y., Kim Y., Roh J., Kim S., Yoon B. Using a neodymium magnet to target delivery of ferumoxide-labeled human neural stem cells in a rat model of focal cerebral ischemia. Hum. Gene Ther. 2010; 21 (5): 603‑610.

13. Kyrtatos P., Lehtolainen P., Junemann-Ramirez M., Garcia-Prieto A., Price A., Martin J., Gadian D., Pankhurst Q., Lythgoe M. Magnetic tagging increases delivery of circulating progenitors in vascular injury. JACC Cardiovasc Interv. 2009; 2 (8): 794‑802.

14. Leong W., Tay C., Yu H., Li A., Wu S., Duc D., Lim C., Tan L. Thickness sensing of hMSCs on collagen gel directs stem cell fate. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2010; 401 (2): 287‑292.


Для цитирования:


Белый Ю.А., Терещенко А.В., Миргородская С.А., Темнов А.А., Семенов А.В., Ревищин А.В., Павлова Г.В., Куст Н.Н. Разработка и экспериментальное обоснование эффективности методики локального субретинального введения ксеногенных стволовых клеток меченых магнитными частицами. Офтальмология. 2014;11(3):45-51. https://doi.org/10.18008/1816-5095-2014-3-45-51

For citation:


Belyy Y.A., Тereshchenko A.V., Mirgorodskaya S.A., Temnov A.A., Semenov A.D., Revishchin A.V., Pavlova G.V., Kust N.N. Development and experimental basis of local subretinal technique of xenogenic’s injection stem cells labelled by magnetic perticles. Ophthalmology in Russia. 2014;11(3):45-51. (In Russ.) https://doi.org/10.18008/1816-5095-2014-3-45-51

Просмотров: 457


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 1816-5095 (Print)
ISSN 2500-0845 (Online)