Суетина Ирина Александровна - кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник.
Москва, 123098, ул. Гамалеи, 18
Suetina Irina. A. - Ph.D., Leading Researcher.
Gamaleya st, 18, Moscow, 123098
Чернакова Галина Мэлсовна - кандидат медицинских наук, доцент.
Бескудниковский бульвар, 59А, Москва, 127486
Chernakova Galina. M. - Ph.D, Docent.
Beskudnikovsky Boulevard, 59a, Moscow, 127486
Майчук Дмитрий Юрьевич - доктор медицинских наук, руководитель терапевтического отдела.
Бескудниковский бульвар, 59А, Москва, 127486
Maychuk Dmitry.Yu. - MD, Head of Therapy Department.
Beskudnikovsky Boulevard, 59a, Moscow, 127486
Руссу Леонид Иванович - научный сотрудник.
Ул. Гамалеи, 18, Москва, 123098
Mezentseva Marina. V. - MD, Head of the Laboratory.
Gamaleya st.,18, Moscow, 123098
Клещева Елена Александровна - кандидат медицинских наук, ассистент кафедры.
Ул. Баррикадная, 2/1, Москва, 123995
Russu Leonid. I.– Researcher.
Gamaleya st.,18, Moscow, 123098
Муртазалиева Саният Магомедовна - врач-офтальмолог.
2-й Боткинский пр-д, 5, Москва, 125284
Klescheva Elena. A. - Ph.D.
2/1 Barrikadnaya St., Moscow, 123995
Мезенцева Марина Владимировна - доктор биологических наук, заведующий лабораторией
Ул. Гамалеи, 18, Москва, 123098
Ophthalmologist.
2-nd Botkinsky passage, 5, Moscow, 125284
Цель: изучить цитологический и иммунологический эффекты, оказываемые одновременным воздействием на культуру нормальных клеток конъюнктивы человека Chanq сonjunсtiva офтальмологических препаратов Броксинак® и Офтальмоферон® для совершенствования методики оценки комбинаций офтальмологических лекарственных средств in vitro.
Материал и методы. Для работы использована перевиваемая культура нормальных клеток конъюнктивы человека Chang conjunctiva, клон 1-5 С-4.
Действие препаратов Броксинак® и Офтальмоферон® количественно определяли по их влиянию на жизнеспособность клеток с помощью МТТ-метода; для изучения изменения морфологии клеток в процессе культивирования использовали метод прижизненного визуального наблюдения. Влияние комбинации препаратов на функциональную активность клеток конъюнктивы оценивали с помощью изучения продукции цитокинов на уровне их транскрипции in vitro.
Результаты. Два исследуемых препарата при инкубации с клетками конъюнктивы в течение 48 часов не вызывают угнетение ростовой активности и жизнеспособности нормальных клеток человека Chang conjunctiva в разведениях 1\512-1/2048 (3 мкг/мл и менее — Броксинак) и 1/32 –1/2048 (625 МЕ/мл и менее — Офтальмоферон). Внесение исследуемых лекарственных средств в культуру клеток Chang conjunctiva в данных концентрациях не изменяло морфологию клеток, и испытуемый образец не отличался от состояния клеток в контроле. Исследование продукции цитокинов клетками конъюнктивы при изолированном использовании Броксинака выявило стимуляцию продукции противовирусных ИФН-α и ИФН-λ и угнетение выработки провоспалительных ИФН-γ, ИЛ-2, ИЛ-8, ИЛ-12. Офтальмоферон стимулировал выработку ИФН-α и Vegf R1. При совместном применении препаратов наблюдали продукцию РНК ИФН-α, ИФН-λ2, ИЛ-2, ИЛ-12.
Заключение. Совместное использование Броксинака и Офтальмоферона в культуре клеток конъюнктивы человека Chang приводит к формированию адекватного противовирусного и противовоспалительного цитокинового ответа — наблюдается усиление продукции ИФН-α, ИФН-λ, ИЛ-2 и ИЛ-12.
Objective. Investigation of the cytological and immunological effects, caused by the simultaneous exposure of normal Chanq conjunctiva cells to ophthalmic drugs Broxinac® and Ophthalmoferon®, in order to improve the evaluation techniques of ophthalmic drugs combinations in vitro.
Material and methods. A transplantable culture of normal Chang conjunctiva cells, clone 1-5 C-4, was used. The drugs Broksinak® and Oftalmoferon® were quantified by their effect on cell viability using the MTT method. The change in cell morphology during the cultivation process was studied by intravital visual observation. The effect of the combination of drugs on the functional activity of conjunctival cells was assessed by production of cytokines at the level of their in vitro transcription.
Results. The investigated drugs (dilutions 1/512-1/2048 Broksinak® and 1/32-1/2048 Oftalmoferon®) were incubated with human Chang conjunctiva cells for 48 hours and did not cause an inhibition of growth activity or viability, and did not change the morphology of the cells, and the test sample was not different from the state of the control cells. Cytokine production by cells of the conjunctiva when exposed to Broksinak® alone stimulated secretion of antiviral IFN-α and IFN-λ and inhibition of production of proinflammatory IFN-γ, IL-2, IL-8, IL-12. Ophthalmoferon stimulated the production of IFN-α and VEGF R1. The production of RNA IFN-α, IFN-λ2, IL-2, IL-12 was observed in drug’s combination.
Сonclusions. The combined use of Broksinak® and Oftalmoferon® on human Chang conjunctiva cells results in the formation of an adequate antiviral and anti-inflammatory cytokine response: i.e. increase of IFNalpha production, IFN-lambda, IL-2 and IL-12.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.