ophthalmologyОфтальмологияOphthalmology in Russia1816-50952500-0845Ophthalmology10.18008/1816-5095-2018-2-167-175ophthalmology-603Research ArticleКЛИНИЧЕСКИЕ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯCLINICAL & EXPERIMENTAL RESEARCHОценка цитотоксичности in vitro как критерий рационального выбора слезозаместительных препаратовCytotoxicity Evaluation Using in vitro System as a Criteria of Rational Choice of Tear SubstitutesАлександроваО. И.AleksandrovaO. I.

Тихорецкий пр., 4, Санкт-Петербург, 194064, Российская Федерация

младший научный сотрудник отдела клеточных культур, лаборатория биологии клетки в культуре, группа клеточной биотехнологии

Tikhoretsky ave., 4, Saint Petersburg, 194064, Russia

junior research scientist, department of cell cultures, laboratory of cell biology in culture, group of cell biotechnology

ОколовИ. Н.OkolovI. N.

ул. Я. Гашека, 21, Санкт-Петербург, 192283, Российская Федерация

кандидат медицинских наук, заведующий клинико-бактериологической лабораторией

Gasheka str., 21, Saint Petersburg, 192283, Russia

PhD, Head of the Clinical Bacteriological Laboratory

oko99@mail.ruХорольскаяЮ. И.KhorolskayaYu. I.

Тихорецкий пр., 4, Санкт-Петербург, 194064, Российская Федерация

лаборант-исследователь, отдел клеточных культур, лаборатория биологии клетки в культуре, группа клеточной биотехнологии

Tikhoretsky ave., 4, Saint Petersburg, 194064, Russia

laboratory assistant-scientist, department of cell cultures, laboratory of cell biology in culture, group of cell biotechnology

ПановаИ. Е.PanovaI. E.

ул. Я. Гашека, 21, Санкт-Петербург, 192283, Российская Федерация

доктор медицинских наук, профессор, зам. директора по научной работе

Gasheka str., 21, Saint Petersburg, 192283, Russia

MD, professor, vice-director

БлиноваМ. И.BlinovaM. I.

Тихорецкий пр., 4, Санкт-Петербург, 194064, Российская Федерация

кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник отдела клеточных культур, лаборатория биологии клетки в культуре, группа клеточной биотехнологии

Tikhoretsky ave., 4, Saint Petersburg, 194064, Russia

PhD, leading research scientist, department of cell cultures, laboratory of cell biology in culture, group of cell biotechnology 

ФГБУН институт цитологии РАНРоссияInstitute of Cytology of the Russian Academy of ScienceRussian FederationСанкт-Петербургский филиал ФГАУ «НМИЦ “МНТК «Микрохирургия глаза»” им. академика С.Н. Федорова» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияSv. Fyodorov Eye Microsurgery Federal State InstitutionRussian Federation201805072018152167175Copyright © Александрова О.И., Околов И.Н., Хорольская Ю.И., Панова И.Е., Блинова М.И., 20182018Александрова О.И., Околов И.Н., Хорольская Ю.И., Панова И.Е., Блинова М.И.Aleksandrova O.I., Okolov I.N., Khorolskaya Y.I., Panova I.E., Blinova M.I.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.ophthalmojournal.com/opht/article/view/603Цель

Цель: сравнительный анализ цитотоксического действия широкой линейки препаратов слезозаместительной терапии в отношении эпителиальных клеток роговицы в условиях in vitro.

Материалы и методы

Материалы и методы. Объектом исследования явились 11 препаратов «искусственных  слез» с различными системами консервантов и 9 бесконсервантных слезозаместителей. В  качестве тест-систем были использованы клетки постоянной трансформированной  клеточной линии эпителия роговицы (HCEC) человека. Цитотоксичность «искусственных  слез» оценивали по жизнеспособности клеток, культивируемых в питательной среде, содержащей в своем составе исследуемые препараты.

Результаты

Результаты. Наиболее токсичными в отношении клеток эпителия роговицы из  слезозаместителей, содержащих консерванты, оказались Лакрисифи, Слезин, Гипромелоза- П и Офтолик®. Близкими к ним по токсичности были Катионорм®, Артелак® Баланс и  Оптив®. Глазные капли Стиллавит, Систейн®Ультра и Блинк®контактс проявили  умеренную токсичность. Визмед® Лайт из группы слезозаместителей с консервантами не  оказывал цитотоксического действия на клетки в условиях in vitro, так же как и  бесконсервантные слезозаместители Хилабак®, Теалоз®, Теалоз Дуо® и Эво Тиарс™.  Цитотоксический эффект в отношении клеток эпителия роговицы выявлен у препаратов  Хилозар-Комод® и Хило®Фреш, несмотря на отсутствие в их составе консерванта.

Заключение

Заключение. Проведенное исследование показало принципиальную возможность  использования систем in vitro для сравнительной оценки цитотоксического действия  препаратов в целях рационального выбора слезозаместителей.

Purpose

Purpose: to evaluate the cytotoxic effect of a wide range of lubricant eye drops on the epithelial cells of the cornea in vitro.

Materials and methods

Materials and methods. The objects of the study were 11 moisture eye drops with various preservatives and 9 moisture eye drops without preservatives. As a test-system permanent transformed cell  lines of corneal epithelial (HCEC) were used. The cytotoxicity of the  “artificial tears” was assessed by the viability of the cells, cultured in substratum containing the solutions of the evaluated eye drops.

Results

Results. The most toxic for corneal epithelial cells among the  moisture eye drops with preservatives were Lacrisifi, Slezin,  Hypromelose-P and Ophtolique®. Close to them in toxicity were  Cationorm®, Artelac® Balance and Optiv®. Eye drops Styllavit,  Systane® Ultra and Blink® contacts showed moderate toxicity.  Vismed® Light from the group of eye lubricants with preservatives  did not exert a cytotoxic effect on the cells in vitro, as well as the  non-preserved eye lubricants Hyabak®, Thealoz®, Thealoz Duo®  and EvoTears™. Cytotoxic effect on corneal epithelial cells was  detected for Hylozar Comod® and Hylo® Fresh eye drops, despite  the absence of preservatives in them.

Conclusion

Conclusion. The study showed a principal possibility of using in vitro systems for comparative evaluation of the cytotoxic effects of various medicines with a purpose of a rational choice of moisture eye drop.

клеточные культурыцитотоксичность«искусственная слеза»консервантыбуферыроговицаэпителий глазной поверхностисell culturescytotoxicityartificial tearspreservativesbuffercorneaocular surface epitheliumReferencesBaudouin C., Labbe A., Liang H., Pauly A., Brignole-Baudouin F. Preservatives in eye drops: the good, the bad and the ugly. Prog Retin Eye Res. 2010;9:312–34. DOI: 10.1016/j.preteyeres.2010.03.001Baudouin C., Labbe A., Liang H., Pauly A., Brignole-Baudouin F. Preservatives in eye drops: the good, the bad and the ugly. Prog Retin Eye Res. 2010;9:312–34. DOI: 10.1016/j.preteyeres.2010.03.001Whitson J., Petroll W. Corneal epithelial cell viability following exposure to ophthalmic solutions containing preservatives and/or antihypertensive agents. Adv Ther. 2012;29:874–88. DOI: 10.1007/s12325-012-0057-1Whitson J., Petroll W. Corneal epithelial cell viability following exposure to ophthalmic solutions containing preservatives and/or antihypertensive agents. Adv Ther. 2012;29:874–88. DOI: 10.1007/s12325-012-0057-1Tu E. Balancing antimicrobial efficacy and toxicity of currently available topical ophthalmic preservatives. Saudi J Ophthalmol. 2014;28(3):182–7. DOI: 10.1016/j.sjopt.2014.06.006Tu E. Balancing antimicrobial efficacy and toxicity of currently available topical ophthalmic preservatives. Saudi J Ophthalmol. 2014;28(3):182–7. DOI: 10.1016/j.sjopt.2014.06.006Elder D., Crowley P. Antimicrobial Preservatives Part One: Choosing a Preservative System. American Pharmaceutical Review. 2012, available from http://www.americanpharmaceuticalreview.com/Featured-Articles/38886-Antimicrobial-Preservatives-Part-One-Choosing-a-Preservative-System/Elder D., Crowley P. Antimicrobial Preservatives Part One: Choosing a Preservative System. American Pharmaceutical Review. 2012, available from http://www.americanpharmaceuticalreview.com/Featured-Articles/38886-Antimicrobial-Preservatives-Part-One-Choosing-a-Preservative-System/Freeman P., Kahook M. Preservatives in Topical Ophthalmic Medications: Historical and Clinical Perspectives. Expert Review of Ophthalmology 2009;4(1):59–64.Freeman P., Kahook M. Preservatives in Topical Ophthalmic Medications: Historical and Clinical Perspectives. Expert Review of Ophthalmology 2009;4(1):59–64.Ammar D., Noecker R., Kahook M.. Effects of benzalkonium chloride-preserved, polyquad- preserved, and sofZia-preserved topical glaucoma medications on human ocular epithelial cells. Adv Ther. 2010 Nov; 27(11):837–45. DOI: 10.1007/s12325-010-0070-1.Ammar D., Noecker R., Kahook M.. Effects of benzalkonium chloride-preserved, polyquad- preserved, and sofZia-preserved topical glaucoma medications on human ocular epithelial cells. Adv Ther. 2010 Nov; 27(11):837–45. DOI: 10.1007/s12325-010-0070-1.Schiffman R., Christianson M., Jacobsen G., Hirsch J., Reis B. Reliability and validity of the ocular surface disease index. Arch Ophthalmol. 2000;118:615–21.Schiffman R., Christianson M., Jacobsen G., Hirsch J., Reis B. Reliability and validity of the ocular surface disease index. Arch Ophthalmol. 2000;118:615–21.Management and therapy of dry eye disease: report of the Management and Therapy Subcommittee of the International Dry Eye WorkShop (2007). Ocul Surf. 2007 Apr;5(2):163–78.Management and therapy of dry eye disease: report of the Management and Therapy Subcommittee of the International Dry Eye WorkShop (2007). Ocul Surf. 2007 Apr;5(2):163–78.Данченко Е.О. Оценка цитотоксичности фармацевтических субстанций с использованием клеточных культур. Иммунология, аллергология, инфектология. 2012;2:22–31. [Danchenko E.O. Evaluation of cytotoxicity of pharmaceutical substances using cell cultures. Immunopathology, allergology, infectology=Immunopatologija, Allergologija, Infektologija. 2012;2:22–31. (In Russ.)]Данченко Е.О. Оценка цитотоксичности фармацевтических субстанций с использованием клеточных культур. Иммунология, аллергология, инфектология. 2012;2:22–31. [Danchenko E.O. Evaluation of cytotoxicity of pharmaceutical substances using cell cultures. Immunopathology, allergology, infectology=Immunopatologija, Allergologija, Infektologija. 2012;2:22–31. (In Russ.)]Еропкин М.Ю., Еропкина Е.М. Клеточные культуры как модельная система исследования токсичности и скрининга цитопротекторных препаратов. Санкт-Петербург: Морсар, 2003. [Eropkin M.Ju., Eropkina E.M. The cell cultures as a model system toxicity studies and screening of cytoprotective drugs. St. Petersburg: Morsar AV, 2003. (In Russ.)]Еропкин М.Ю., Еропкина Е.М. Клеточные культуры как модельная система исследования токсичности и скрининга цитопротекторных препаратов. Санкт-Петербург: Морсар, 2003. [Eropkin M.Ju., Eropkina E.M. The cell cultures as a model system toxicity studies and screening of cytoprotective drugs. St. Petersburg: Morsar AV, 2003. (In Russ.)]Аникина Л.В., Пухов С.А., Дубровская Е.С., Афанасьева С.В., Клочков С.Г. Сравнительное определение жизнеспособности клеток с помощью МТТ и ресазурина. Фундаментальные исследования. 2014;12:1423–1427. [Anikina L.V., Puhov S.A., Dubrovskaja E.S., Afanas’eva S.V., Klochkov S.G. Comparative determination of cell viability using the MTT and Resazurin. Fundamental research=Fundamental’nye issledovaniya. 2014;12:1423–1427. (In Russ.)]Аникина Л.В., Пухов С.А., Дубровская Е.С., Афанасьева С.В., Клочков С.Г. Сравнительное определение жизнеспособности клеток с помощью МТТ и ресазурина. Фундаментальные исследования. 2014;12:1423–1427. [Anikina L.V., Puhov S.A., Dubrovskaja E.S., Afanas’eva S.V., Klochkov S.G. Comparative determination of cell viability using the MTT and Resazurin. Fundamental research=Fundamental’nye issledovaniya. 2014;12:1423–1427. (In Russ.)]Urcan E., Haertel U., Styllou M., Hickel R., Scherthan H., Reichl F. Real-time xCELLigence impedance analysis of the cytotoxicity of dental composite components on human gingival fibroblasts. Dent Mater. 2010;26:1:51–8. DOI: 10.1016/j.dental.2009.08.007Urcan E., Haertel U., Styllou M., Hickel R., Scherthan H., Reichl F. Real-time xCELLigence impedance analysis of the cytotoxicity of dental composite components on human gingival fibroblasts. Dent Mater. 2010;26:1:51–8. DOI: 10.1016/j.dental.2009.08.007Александрова О.И., Околов И.Н., Тахтаев Ю.В., Хорольская Ю.И., Хинтуба Т.С., Блинова М.И. Сравнительная оценка цитотоксичности антимикробных глазных капель. Офтальмологические ведомости. 2015;8(1):89–97. [Aleksandrova O.I., Okolov I.N., Tahtaev Ju.V., Horol’skaja Ju.I., Hintuba T.S., Blinova M.I. Competitive evaluation of cytotoxicity of antibacterial eye drops. Sravnitel’naja ocenka citotoksichnosti antimikrobnyh glaznyh kapel’. Oftal’mologicheskie vedomosti. 2015;8(1):89–97. (In Russ.)]Александрова О.И., Околов И.Н., Тахтаев Ю.В., Хорольская Ю.И., Хинтуба Т.С., Блинова М.И. Сравнительная оценка цитотоксичности антимикробных глазных капель. Офтальмологические ведомости. 2015;8(1):89–97. [Aleksandrova O.I., Okolov I.N., Tahtaev Ju.V., Horol’skaja Ju.I., Hintuba T.S., Blinova M.I. Competitive evaluation of cytotoxicity of antibacterial eye drops. Sravnitel’naja ocenka citotoksichnosti antimikrobnyh glaznyh kapel’. Oftal’mologicheskie vedomosti. 2015;8(1):89–97. (In Russ.)]Александрова О.И., Хорольская Ю.И., Майчук Д.Ю., Блинова М.И. Исследование общей цитотоксичности антибиотиков аминогликозидного и фторхинолонового ряда на клеточных культурах. Вестник офтальмологии. 2015;5:39–48. [Aleksandrova O.I., Horol’skaja Ju.I., Majchuk D.Ju., Blinova M.I. Study of the general cytotoxicity of antibiotics of aminoglycoside fluoroquinolone groups on cell cultures. Annals of Ophthalmology=Vestnik oftal’mologii 2015;5:39– 48. (In Russ.)] DOI: 10.17116/oftalma2015131543-53Александрова О.И., Хорольская Ю.И., Майчук Д.Ю., Блинова М.И. Исследование общей цитотоксичности антибиотиков аминогликозидного и фторхинолонового ряда на клеточных культурах. Вестник офтальмологии. 2015;5:39–48. [Aleksandrova O.I., Horol’skaja Ju.I., Majchuk D.Ju., Blinova M.I. Study of the general cytotoxicity of antibiotics of aminoglycoside fluoroquinolone groups on cell cultures. Annals of Ophthalmology=Vestnik oftal’mologii 2015;5:39– 48. (In Russ.)] DOI: 10.17116/oftalma2015131543-53Александрова О.И., Околов И.Н., Хорольская Ю.И., Блинова М.И., Чураков Т.K. Оценка влияния бензалкония хлорида на цитотоксичность глазных капель Неттацин и Тобрекс в условиях in vitro. Cовременные технологии в офтальмологии. 2016;3:163–166. [Aleksandrova O.I., Okolov I.N., Horol’skaja Ju.I., Blinova M.I., Churakov T.K. Evaluation of BAK influence on cytotoxicity of eye drops Nettacin and Tobrex in vitro. Ocenka vlijanija benzalkonija hlorida na citotoksichnost’ glaznyh kapel’ Nettacin i Tobreks v uslovijah in vitro. Sovremennye tehnologii v oftal’mologii, 2016;3:163–166. (In Russ.)]Александрова О.И., Околов И.Н., Хорольская Ю.И., Блинова М.И., Чураков Т.K. Оценка влияния бензалкония хлорида на цитотоксичность глазных капель Неттацин и Тобрекс в условиях in vitro. Cовременные технологии в офтальмологии. 2016;3:163–166. [Aleksandrova O.I., Okolov I.N., Horol’skaja Ju.I., Blinova M.I., Churakov T.K. Evaluation of BAK influence on cytotoxicity of eye drops Nettacin and Tobrex in vitro. Ocenka vlijanija benzalkonija hlorida na citotoksichnost’ glaznyh kapel’ Nettacin i Tobreks v uslovijah in vitro. Sovremennye tehnologii v oftal’mologii, 2016;3:163–166. (In Russ.)]Александрова О.И., Околов И.Н., Хорольская Ю.И., Панова И.Е., Блинова М.И. Возможности клеточных технологий для рациональной фармакотерапии глазных патологий. Cовременные технологии в офтальмологии. 2017;7:5–7. [Aleksandrova O.I., Okolov I.N., Horol’skaja Ju.I., Panova I.E., Blinova M.I. Possibilities of cell technologies for rational pharmacotherapy of eye pathologies. Vozmozhnosti kletochnyh tehnologij dlja racional’noj farmakoterapii glaznyh patologij. Sovremennye tehnologii v oftal’mologii. 2017;7:5–7. (In Russ.)]Александрова О.И., Околов И.Н., Хорольская Ю.И., Панова И.Е., Блинова М.И. Возможности клеточных технологий для рациональной фармакотерапии глазных патологий. Cовременные технологии в офтальмологии. 2017;7:5–7. [Aleksandrova O.I., Okolov I.N., Horol’skaja Ju.I., Panova I.E., Blinova M.I. Possibilities of cell technologies for rational pharmacotherapy of eye pathologies. Vozmozhnosti kletochnyh tehnologij dlja racional’noj farmakoterapii glaznyh patologij. Sovremennye tehnologii v oftal’mologii. 2017;7:5–7. (In Russ.)]Александрова О.И., Околов И.Н., Хорольская Ю.И., Панова И.Е., Блинова М.И. Оценка цитотоксичности слезозаместительных препаратов с использованием системы in vitro. Офтальмология. 2017;14(1):59–64). [Aleksandrova O.I., Okolov I.N., Horol’skaja Ju.I., Panova I.E., Blinova M.I. Cytotoxicity evaluation of tear substitutes using in vitro system. Ocenka citotoksichnosti slezozamestitel’nyh preparatov s ispol’zovaniem sistemy in vitro. Оphthalmology in Russia=Oftal’mologiya. 2017;14(1):59–64). DOI: 10.18008/1816-5095- 2017-1-59-66. (In Russ.).] DOI: http://dx.doi.org/10.18008/1816-5095-2017-1-59-66Александрова О.И., Околов И.Н., Хорольская Ю.И., Панова И.Е., Блинова М.И. Оценка цитотоксичности слезозаместительных препаратов с использованием системы in vitro. Офтальмология. 2017;14(1):59–64). [Aleksandrova O.I., Okolov I.N., Horol’skaja Ju.I., Panova I.E., Blinova M.I. Cytotoxicity evaluation of tear substitutes using in vitro system. Ocenka citotoksichnosti slezozamestitel’nyh preparatov s ispol’zovaniem sistemy in vitro. Оphthalmology in Russia=Oftal’mologiya. 2017;14(1):59–64). DOI: 10.18008/1816-5095- 2017-1-59-66. (In Russ.).] DOI: http://dx.doi.org/10.18008/1816-5095-2017-1-59-66Александрова О.И., Околов И.Н., Хорольская Ю.И., Панова И.Е., Блинова М.И. Влияние нестероидных противовоспалительных глазных капель на клетки эпителия роговицы и конъюнктивы человека в условиях in vitro. Офтальмология. 2017;15(3):251– 259. [Aleksandrova O.I., Okolov I.N., Horol’skaja Ju.I., Panova I.E., Blinova M.I. Influence of NSAID eye drops on corneal epithelial cells in vitro. Оphthalmology in Russia=Oftal’mologiya. 2017;15(3):251– 259. (In Russ.)] DOI: 10.18008/1816-5095-2017-3-251-259Александрова О.И., Околов И.Н., Хорольская Ю.И., Панова И.Е., Блинова М.И. Влияние нестероидных противовоспалительных глазных капель на клетки эпителия роговицы и конъюнктивы человека в условиях in vitro. Офтальмология. 2017;15(3):251– 259. [Aleksandrova O.I., Okolov I.N., Horol’skaja Ju.I., Panova I.E., Blinova M.I. Influence of NSAID eye drops on corneal epithelial cells in vitro. Оphthalmology in Russia=Oftal’mologiya. 2017;15(3):251– 259. (In Russ.)] DOI: 10.18008/1816-5095-2017-3-251-259Cancer cell culture: methods and protocols / Ser. Methods in Molecular Medicine. Vol. 88. (Ed. S.P. Langdon). Totowa, NJ: Humana Press, 2003. 165–169 p.,Cancer cell culture: methods and protocols / Ser. Methods in Molecular Medicine. Vol. 88. (Ed. S.P. Langdon). Totowa, NJ: Humana Press, 2003. 165–169 p.,Kahook M. Preservatives in Topical Ophthalmic Medications: Historical and Clinical Perspectives. Expert Review of Ophthalmology. 2009;4(1):59–64.Kahook M. Preservatives in Topical Ophthalmic Medications: Historical and Clinical Perspectives. Expert Review of Ophthalmology. 2009;4(1):59–64.Epstein S., Ahdoot M., Marcus E., Asbell P. Comparative toxicity of preservatives on immortalized corneal and conjunctival epithelial cells. J Ocul Pharmacol Ther 2009;25(2):113–9.Epstein S., Ahdoot M., Marcus E., Asbell P. Comparative toxicity of preservatives on immortalized corneal and conjunctival epithelial cells. J Ocul Pharmacol Ther 2009;25(2):113–9.Noecker R. Effects of common ophthalmic preservatives on ocular health. Adv Ther. 2001 Sep-Oct; 18(5):205–15.Noecker R. Effects of common ophthalmic preservatives on ocular health. Adv Ther. 2001 Sep-Oct; 18(5):205–15.Schrage N., Frentz M., Spoeler F. The Ex Vivo Eye Irritation Test (EVEIT) in evaluation of artificial tears: Purite-preserved versus unpreserved eye drops. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 2012 Sep; 250(9):1333–40. DOI: 10.1007/s00417-012-1999-3Schrage N., Frentz M., Spoeler F. The Ex Vivo Eye Irritation Test (EVEIT) in evaluation of artificial tears: Purite-preserved versus unpreserved eye drops. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 2012 Sep; 250(9):1333–40. DOI: 10.1007/s00417-012-1999-3Samar K. Basak Preservatives and Ocular Surface Diseases. Kerala Journal of Ophthalmology. 2016;18(4):311–6.Samar K. Basak Preservatives and Ocular Surface Diseases. Kerala Journal of Ophthalmology. 2016;18(4):311–6.Schrage N., Frentz M., Reim M. Changing the composition of buffered eye-drops prevents undesired side effects. Br J Ophthalmol. 2010;94:1519–22. DOI: 10.1136/bjo.2009.177386Schrage N., Frentz M., Reim M. Changing the composition of buffered eye-drops prevents undesired side effects. Br J Ophthalmol. 2010;94:1519–22. DOI: 10.1136/bjo.2009.177386Mueller-Lierheim. Traenenersatz- und Kontaktlinsenbenetzungsloesungen. In: Köln Biermann, ed. Aktuelle Kontaktologie. 2015:8–15.Mueller-Lierheim. Traenenersatz- und Kontaktlinsenbenetzungsloesungen. In: Köln Biermann, ed. Aktuelle Kontaktologie. 2015:8–15.Houlsby R., Ghajar M., Chavez G. Antimicrobial activity of boratebuffered solutions. Antimicrob Agents Chemother. 1986;29:803–6.Houlsby R., Ghajar M., Chavez G. Antimicrobial activity of boratebuffered solutions. Antimicrob Agents Chemother. 1986;29:803–6.Lehmann D., Cavet M., Richardson M. Nonclinical safety evaluation of boric acid and a novel borate-buffered contact lens multi-purpose solution, Biotrue™ multipurpose solution. Cont Lens Anterior Eye. 2010 Dec; 33 Suppl 1:S24–32. DOI: 10.1016/j.clae.2010.06.010Lehmann D., Cavet M., Richardson M. Nonclinical safety evaluation of boric acid and a novel borate-buffered contact lens multi-purpose solution, Biotrue™ multipurpose solution. Cont Lens Anterior Eye. 2010 Dec; 33 Suppl 1:S24–32. DOI: 10.1016/j.clae.2010.06.010Graupner O., Hausmann C. The alternation of the pH in the anterior chamber of the rabbits eye burned with smallest volumes of high concentrated acid and base [in German]. Albrecht Von Graefes Arch Klin Exp Ophthalmol. 1968;176:48–53.Graupner O., Hausmann C. The alternation of the pH in the anterior chamber of the rabbits eye burned with smallest volumes of high concentrated acid and base [in German]. Albrecht Von Graefes Arch Klin Exp Ophthalmol. 1968;176:48–53.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.