Preview

Офтальмология

Расширенный поиск

Иммунное картирование периферического отдела зрительного анализатора и зрительного нерва

https://doi.org/10.18008/1816-5095-2014-3-38-44

Полный текст:

Аннотация

Цель: проведение иммунного картирования периферического отдела зрительного анализатора и зрительного нерва для выявления потенциальных антигенных мишеней аутоиммунной агрессии.

Методы. Исследовали энуклеированные глаза пациентов с терминальной болящей открытоугольной глаукомой (n = 30). Проводили иммуногистохимическое исследование (ИГХ) на парафиновых срезах препаратов изолированной сетчатки и зрительного нерва с использованием широкого спектра антител: моноклональных мышиных антител Myelin Basic Protein (MBP), поликлональных кроличьих антител AntiAlpha Fodrin (α-fodrin), моноклональных мышиных антител NSE2 (NSE), моноклональных мышиных антител Anti-GFAP (GFAP), поликлональных кроличьих антител S-100p (S100). Для визуализации ИГХ реакции использовали специальную систему детекции (Mouse and Rabbit Specific HRP / AEC (ABC) Detection IHC Kit). Негативным контролем служила ИГХ реакция без добавления первичных антител (АТ). Отрицательной считали реакцию при отсутствии специфического окрашивания клеток или при наличии менее 10 % окрашенных клеток от всей площади в зоне просмотра. Слабо положительной реакцию считали в случае окрашивания от 10 до 30 % клеток. Умеренно положительной считали реакцию в случае экспрессии маркера в 30‑75 % клеток. Экспрессию маркера более 75 % клеток расценивали как выраженную реакцию. Наряду с этим, отмечали интенсивность окраски: +1 (слабая окраска), +2 (умеренная окраска), +3 (выраженная окраска), +4 (интенсивное окрашивание).

Результаты. Иммунное картирование с широкой панелью моноклональных антител позволило выявить структуры глаза, окрашенные ИГХ-маркерами. Сетчатка окрашивалась практически всеми используемыми маркерами нейрональной дифференцировки (антителами к NSE, GFAP и S100), а также антителами к α-fodrin. Исключение составили антитела к MBP. Интенсивность ИГХ-реакции в различных ее слоях и структурах варьировала и зависела от маркера. Цитоплазма отростков глиальных элементов зрительного нерва умеренно (2+) окрашивалась антителами к МBP, NSE, GFAP, S100 и более выражено (3+) — антителами к α-fodrin.

Заключение. Проведена полноценная маркировка структур сетчатки, в которой три вида зрительных нейронов, зрительные аксоны, интернейроны, клетки микроглии получили ИГХ-профиль. Выявленные особенности ИГХ-профиля слоев сетчатки и структур зрительного нерва могут быть полезны в качестве маркеров серологической иммунодиагностики глазных болезней.

Об авторах

В. Г. Лихванцева
ФГ БОУ ВПО МГ У им. М. В. Ломоносова, кафедра офтальмологии
Россия


К. А. Кузьмин
ФГ БОУ ВПО МГ У им. М. В. Ломоносова, кафедра офтальмологии
Россия


М. В. Соломатина
ГБОУ ВПО «Рязанский государственный медицинский университет имени академика И. П. Павлова», кафедра глазных и ЛОР болезней
Россия


Е. В. Коростелёва
ФГ БОУ ВПО МГ У им. М. В. Ломоносова, кафедра офтальмологии
Россия


А. Бен Режеб
ГБОУ ВПО «Рязанский государственный медицинский университет имени академика И. П. Павлова», кафедра глазных и ЛОР болезней
Россия


Список литературы

1. Chekhonin V. P., Lebedev S. V., Blinov D. V., Turina O. I., Semenova A. V., Lazarenko I. P., Petrov S. V., Ryabukhin I. L., Rogatkin S. O., Volodin N. N. [Pathogenetic role of the permeability disorder of the blood-brain barrier to neurospecific proteins with perinatal hypoxic-ischemic lesions of the central nervous system in newborns]. Patogeneticheskaya rol’ narusheniy pronitsaemosti gematoentsefalicheskogo bar’era dlya neyrospetsificheskikh belkov pri perinatal’nykh gipoksicheskkh narusheniyakh tsentral’noy nervnoy sistemy u novorozhdennykh. [Questions of gynecology, obstetrics and perinatology]. Voprosy ginekologii, akusherstva i perinatologii 2004; 3: 50‑61 (in Russ.).

2. Ilyenko L. I., Zubareva E. A., Kholodova I. N. [Modern approaches to diagnostics and treatment of hypoxic-ischemic CNS lesions in term infants of the first year of life]. Sovremennye podkhody k diagnostike i lecheniyu gipoksicheskikh-ishemicheskikh povrezhdeniy TsNS u detey pervogo goda zhizni. [Pediatrics]. Pediatriya. 2003; 2: 87‑92 (in Russ.).

3. Goncharova O. V., Bakanov M. I., Mutalov A. G., Greshilov A. A., Dzhumagaziev A. A., Yusupova E. S. [Modern biochemical criteria of diagnosis of perinatal hypoxic CNS lesions in infants]. Sovremennye biokhimicheskie kriterii diagnostiki perinatal’nykh gipoksicheskikh narusheniy TsNS. [Russian pediatric journal]. Rossiiskii pediatricheskii zhurnal 2007; 4: 13‑18 (in Russ.).

4. Anand N., Stead LG. Neuron-specific enolase as a marker for acute ischemic stroke: a systematic review. Cerebrovascular Disease. 2005; 20: 213‑219.

5. Zovein A., Flowers-Ziegler J., Thamotharan S., Shin D., Sankar R., Nguyen K., Gambhir S., Devaskar S. U. Postnatal hypoxic-ischemia brain injury alters mechanisms mediating neuronal glucose transport. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2004; 286: 273‑282.

6. Yu-Wai-Man P., Griffiths P. G., Chinnery P. F. Mitochondrial optic neuropathies — disease mechanisms and therapeutic strategies. Prog Retin Eye Res. 2011; 30 (2): 81‑114.

7. Tezel G., Yang X., Luo C., Kain A., Powell D., Kuehn M. H., Kaplan H. J. Oxidative stress and the regulation of complement activation in human glaucoma. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2010; 51 (10): 5071‑5082.

8. Bambrick L., Kristian T., Fiskum G., Bambrick L. Astrocyte mitochondrial mechanisms of ischemic brain injury and neuroprotection. Neurochemical Research. 2004; 29: 601‑608.

9. Lukyanova L. D. [Role of bioenergy disorders in the pathogenesis of hypoxia]. Rol’ bioenergeticheskikh narusheniy v patogeneze gipoksii. [Pathological physiology and experimental therapy]. Patologicheskaya fiziologiya i eksperimental’naya terapiya. 2004; 2: 2‑11 (in Russ.).

10. Kann O, Kovаcs R. Mitochondria and neuronal activity. American Journal of Physiology — Cell Physiology. 2007; 292: 641‑657.

11. Yang J., Tezel G., Patil R. V., Romano C., Wax M. B. Serum autoantibody against glutathione S-transferase in patients with glaucoma. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2001; 42: 1273‑1276.

12. Kremmer S., Kreuzfelder E., Klein R., Bontke N., Henneberg-Quester K. B., Steuhl K. P. Antiphosphatidylserine antibodies are elevated in normal tension glaucoma. Clin Exp Immunol. 2001; 125: 211‑215.

13. Ikeda Y., Maruyama I., Nakazawa M., Ohguro H. Clinical significance of serum antibody against neuron-specific enolase in glaucoma patients. Jpn J Ophthalmol. 2002; 46: 13‑17.

14. Maruyama I., Ohguro H., Ikeda Y. Retinal ganglion cells recognized by serum autoantibody against gamma-enolase found in glaucoma patients. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2000; 41: 1657‑1665.

15. Tezel G, Edward DP., Wax M. B. Serum autoantibodies to optic nerve head glycosaminoglycans in patients with glaucoma. Arch Ophthalmol. 1999; 117: 917‑924.

16. Romano C., Barrett D. A., Li Z., Pestronk A., Wax M. B. Anti-rhodopsin antibodies in sera from subjects with normal-pressure glaucoma. Invest Ophthalmol Vis Sci. 1995; 36: 1968‑1975.

17. Grus F. H., Joachim S. C., Bruns K., Lackner K. J., Pfeiffer N., Wax M. B. Serum autoantibodies to alpha-fodrin are present in glaucoma patients from Germany and the United States. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2006; 47: 968‑976.

18. Tezel G., Li L. Y., Patil R. V., Wax M. B. TNF-alpha and TNF-alpha receptor-1 in the retina of normal and glaucomatous eyes. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2001; 42: 1787‑1794.

19. Wax M. B., Tezel G. Immunoregulation of RGC fate in glaucoma. Experimental Eye Research. 2009; 88: 825‑830.

20. Surgucheva I., McMahan B., Ahmed F., Tomarev S., Wax M. B., Surguchov A. Synucleins in glaucoma: implication of gammasynuclein in glaucomatous alterations in the optic nerve. J Neurosci Res. 2002; 68: 97‑106.

21. Tezel G., Seigel G. M., Wax M. B. Autoantibodies to small heat shock proteins in glaucoma. Invest Ophthalmol Vis Sci. 1998; 39: 2277‑2287.

22. Tezel G., Hernandez R., Wax M. B. Immunostaining of heat shock proteins in the retina and optic nerve head of normal and glaucomatous eyes. Arch Ophthalmol. 2000; 118: 511‑518.

23. Wax M. B. The case for autoimmunity in glaucoma. Experimental Eye Research. 2011; 93 (2): 187‑190.

24. Junglas B., Kuespert S., Seleem A. A. Connective tissue growth factor causes glaucoma by modifying the actin cytoskeleton of the trabecular meshwork. Am J Pathol. 2012; 180 (6): 2386‑2403.

25. Pascale A., Drago F., Govoni S. Protecting the retinal neurons from glaucoma: Lowering ocular pressure is not enough. Pharmacological Research. 2012; 66 (1): 19‑32.


Для цитирования:


Лихванцева В.Г., Кузьмин К.А., Соломатина М.В., Коростелёва Е.В., Бен Режеб А. Иммунное картирование периферического отдела зрительного анализатора и зрительного нерва. Офтальмология. 2014;11(3):38-44. https://doi.org/10.18008/1816-5095-2014-3-38-44

For citation:


Likhvantseva V.G., Kuzmin K.A., Solomatina M.V., Korosteleva E.V., Ben Regeb A. Immune mapping of the peripheral part of the visual analyzer and optic nerve. Ophthalmology in Russia. 2014;11(3):38-44. (In Russ.) https://doi.org/10.18008/1816-5095-2014-3-38-44

Просмотров: 465


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 1816-5095 (Print)
ISSN 2500-0845 (Online)