Исследование влияния рибофлавин-ультрафиолет индуцированного кросс-линкинга на роговицу в эксперименте

Цель. Морфологическая оценка эффективности воздействия различных доз рибофлавин-ультрафиолет (УФ) индуциро- ванного кросс-линкинга на состояние стромы роговицы у экспериментальных животных.
Методы. В работе использовали кроликов самцов породы Шиншилла массой 1,5-2,0кг. Эксперимент проводили на 20 глазах 10 животных, которым выполняли рутинную процедуру кросс-линкинга. Экспериментальные животные в зависимости от мощности УФ облучения были разделены на 4 группы: животные 1 группы с минимальной интенсивностью облучения (30 минут, 0,27 Дж), животные 2 группы со средней интенсивностью облучения (15 минут, 0,34 Дж), животные 3 группы с высокой интенсивностью облучения (30 минут, 0,34 Дж), контрольная 4 группа (без УФ облучения). Срок динамического наблюдения за экспериментальными животными составлял 5 дней, после чего животных выводили из эксперимента. Морфологические исследования проводили с помощью световой и электронной микроскопии.
Результаты. В группах опытных животных с воздействием рибофлавин-УФ облучения в строме роговой оболочки по- явились участки поперечно-сшитых коллагеновых волокон и фибрилл. В зоне сшивки обнаруживали активированные ке- ратобласты. Вблизи мембраны этих клеток содержимое вакуоли высвобождается и филаменты достраивают коллагеновые волокна. Наружный эпителий роговиц всех опытных животных восстанавливался полностью, при этом морфологических признаков повреждения эндотелия обнаружено не было. Обнаружены кератоциты в неактивной форме и коллагеновые во- локна стромы, упакованные в виде пластин или пучков с характерной слоистостью и ориентацией.
Заключение. Проведенные исследования показали, что УФ облучение роговицы приводит к появлению сшивок между волокнами коллагена и активно синтезирующих клеток в строме роговицы, что указывает на возможную стимуляцию кол- лагенообразующих процессов. При сверхпороговых значениях энергии УФ облучения нами не было выявлено морфологиче- ских признаков повреждения эндотелиального слоя роговицы.

1. Анисимов С. И., Пожарицкий М. Д., Ларионов Е. В. и др. Первый опыт коррек- ции прогрессирующего гиперметропического сдвига методом роговичного кросс-линкинга у пациентов, перенесших в прошлом радиальную кератото- мию // Офтальмология. — 2010. — Т. 7, No 4. — С. 5-10.

2. Jankov L. Mr. Corneal Collagen Cross-Linking // Middle East Afr. J. Ophthalmol. — 2010. — Vol. 17. — P. 21-27.

3. Kruse FE. Stem cells and corneal epithelial regeneration // Eye. — 1994. — Vol. 8. — P. 170-183.

4. Mazzotta C. Treatment of progressive keratoconus by riboflavin-UVA-induced cross-linking of corneal collagen: ultrastructural analysis by Heidelberg Retinal Tomograph II in vivo confocal microscopy in humans // Cornea. — 2007. — Vol. 26. — P. 390-397.

5. Spoerl E. Stress-strain measurements of human and porcine corneas after ri- boflavin-ultraviolet-A-induced cross-linking // Cornea. — 2004. — Vol. 26. — P. 385-389.

6. Spoerl E. Safety of UVA-riboflavin cross-linking of the cornea // Cornea. — 2007. — Vol. 26. — P. 385-389.

7. Spoerl E., Huhle M., Seiler T. Induction of cross-links in corneal tissue // Exp. Eye Res. — 1998. — Vol. 66. — P. 97-103.

8. Tuft S. Epidemiology of Keratoconus // Cornea. — 2011. — Vol. 28. — P. 248-252.

9. Wollensak G. Crosslinking treatment of progressive keratoconus: new hope // J. Cataract Refract. Surg. — 2006. — Vol. 29. — P. 1786-1790.

10. Wollensak G. Review crosslinking treatment of progressive keratoconus: new hope // Opin Ophthalmol. — 2006. — Vol. 17. — P. 356-360.

11. Wollensak G. Gel electrophoretic analysis of corneal collagen after photody- namic cross-linking treatment // Cornea. — 2008. — Vol. 27. — P. 353-356.

12. Wollensak G. Endothelial cell damage after riboflavin-ultraviolet-A treat- ment in the rabbit // J. Cataract. Refract. Surg. — 2003. — Vol. 29. — P. 1786-190. 13. 13. Wollensak G. Significance of the lacunar hydratation pattern after corneal cross linking // Cornea. — 2010. — Vol. 29. — P. 899-903.