Preview

Офтальмология

Расширенный поиск

Оценка цитотоксичности слезозаместительных препаратов с использованием системы in vitro

https://doi.org/10.18008/1816-5095-2017-1-59-66

Полный текст:

Аннотация

Цель: Анализ цитотоксического действия слезозаместительных глазных капель с различными консервантами и без них на эпителиальные клетки конъюнктивы и роговицы в условиях in vitro.

Материалы и методы. Объектом исследования явились семь слёзозаместительных препаратов: Хилабак®, Теалоз®, Систейн Ультра®, Катионорм®, Офтолик®, Артелак® Баланс, Оптив®. В качестве тест-систем были использованы трансформированные клетки нормальных тканей глаза: постоянные трансформированные клеточные линии конъюнктивы (Chang Conjunctiva, Clone 1-5c-4) и роговицы (HCEC) человека. Цитотоксичность «искус- ственных слез» оценивали по жизнеспособности клеток, культивируемых в питательных средах, содержащих в своём составе исследуемые препараты в концентрации 1, 5 и 10%. О жизнеспособности клеток судили по их морфологии и метаболической активности.

Результаты. Наибольшую чувствительность к действию исследуемых слезозаместителей показала тест-система на основе клеток роговицы человека. Четыре из семи исследуемых препаратов (Артелак® Баланс, Оптив®, Катионорм®, Офтолик®) в концентрации 10% от объема питательной среды проявили высокую степень токсичности в отношении клеток роговицы. Глазные капли Систейн Ультра® оказали умеренное токсическое действие на клетки роговицы и конъюнктивы в концентрации 5 и 10% от объема питательной среды. Слезозаместители Хилабак® и Теалоз® в этой концентрации не оказали цитотоксического действия на клетки ни одной тест-системы и показали наилучшие результаты при исследовании. Независимо от концентрации, наиболее токсичными для всех типов клеток оказались препараты Офтолик® и Артелак® Баланс.

Заключение. Установлена прямая зависимость между концентрацией исследуемых препаратов в питательной среде и их цитотоксичностью. Глазные капли Хилабак® и Теалоз®, не содержащие в своем составе консервант, не оказывали цитотоксическое действие на клетки обеих тест-систем при всех используемых концентрациях. Наименьшим токсическим эффектом из тестируемых слезозаместителей с «мягким» консервантом обладали глазные капли Систейн Ультра®, содержащие Поликвад®. Среди «искусственных слез» наибольшее токсическое действие на все типы клеток при всех используемых концентрациях было отмечено у глазных капель Офтолик (БАК 0,01%) и Артелак® Баланс (Оксид). Проведённые исследования показали принципиальную возможность использования систем in vitro для сравнительной оценки цитотоксического действия слезозаместителей. 

Об авторах

О. И. Александрова
ФГБУН институт цитологии РАН, Санкт-Петербург
Россия

младший научный сотрудник, отдел клеточных культур, лаборатория биологии клетки в культуре, группа клеточной биотехнологии,

Тихорецкий пр. 4, Санкт-Петербург, 194064



И. Н. Околов
Санкт-Петербургский филиал ФГАУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова МЗ РФ
Россия

к.м.н., заведующий клинико-бактериологической лабораторией,

 ул. Я.Гашека, 21, Санкт-Петербург, 192283



Ю. И. Хорольская
ФГБУН институт цитологии РАН, Санкт-Петербург
Россия

лаборант-исследователь, отдел клеточных культур, лаборатория биологии клетки в культуре, группа клеточной биотехнологии,

Тихорецкий пр. 4, Санкт-Петербург, 194064



И. Е. Панова
Санкт-Петербургский филиал ФГАУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова МЗ РФ
Россия

д.м.н., профессор, зам. директора по научной работе,

 ул. Я.Гашека, 21, Санкт-Петербург, 192283



М. И. Блинова
ФГБУН институт цитологии РАН, Санкт-Петербург
Россия

к.б.н., ведущий научный сотрудник отдела клеточных культур, лаборатория биологии клетки в культуре, группа клеточной биотехнологии,

Тихорецкий пр. 4, Санкт-Петербург, 194064



Список литературы

1. Tsubota K., Kawashima M., Inaba T. The antiaging approach for the treatment of dry eye. Cornea. 2012;31:1:3–8. DOI:10.1097/ICO.0b013e31826a05a8

2. Versura P., Profazio V., Giannaccare G. Discomfort symptoms reduction and ocular surface parameters recovery with Artelac Rebalance treatment in mild–moderate dry eye. Europ. J. Ophthalmol. 2013;23:4:488–495. DOI:10.5301/ejo.5000267

3. Bron A., Tomlinson A., Foulks G., Pepose J., Baudouin C., Geerling G. Rethinking dry eye disease: a perspective on clinical implications. Ocul Surf. 2014;12:1-31. DOI: 10.1016/j.jtos.2014.02.002

4. Brzheskij V. V., Kalinina I. V., Popov V. Yu. [New possibilities of drug therapy of patients with corneal conjunctival xerosis]. [Clinical Ophthalmology]. Klinicheskaya oftal'mologiya. 2016;1:39-46. (In Russ.).

5. Baudouin C., Labbé A., Liang H., Pauly A., Brignole-Baudouin F. Preservatives in eye drops: the good, the bad and the ugly. Prog Retin Eye Res. 2010; 9:312-334. DOI: 10.1016/j.preteyeres.2010.03.001.

6. Epstein S., Ahdoot M., Marcus E., Asbell P. Comparative toxicity of preservatives on immortalized corneal and conjunctival epithelial cells. J Ocul Pharmacol Ther. 2009; 25:113-119. DOI: 10.1089/jop.2008.0098.

7. Whitson J., Petroll W. Corneal epithelial cell viability following exposure to ophthalmic solutions containing preservatives and/or antihypertensive agents. Adv Ther. 2012;29:874-888. DOI: 10.1007/s12325-012-0057-1

8. Wilson W., Duncan A., Jay J.. Effect of benzalkonium chloride on the stability of the precorneal tear film in rabbit and man. Br J Ophthalmol. 1975;59:11:667-669.

9. Danchenko E.O. [Assessment of cytotoxicity pharmaceuticals using cell cultures] Otsenka tsitotoksichnosti farmatsevticheskikh substantsiy s ispol'zovaniem kletochnykh kul'tur. [Immunology, Allergology, Infectology]. Immunopatologiya, Allergologiya, Infektologiya 2012;2: 22-31. (In Russ.).

10. Drozdov F.V., Mekhtiev A.R., Morozevich G.E., Timofeev V.P., Misharin A.Yu. [Cytotoxic derivatives (22R, 23R) — digidroxsistigmastana]. Tsitotoksichnye proizvodnye (22R, 23R) — digidroksistigmastana. [Bioorgan. Chemistry]. Bioorgan. khimiya. 2007; 33: 349-356. (In Russ.).

11. Eropkin M.Ju., Eropkina E.M. The cell cultures as a model system toxicity studies and screening of cytoprotective drugs. — SPb.: Morsar AV, 2003. (In Russ.).

12. Romanova S.G., Serebrennikova G.A., Shtil' A.A. [Synthesis and study of properties of cytotoxic and hemolytic activity of cationic glycerolipids alkyl type]. Sintez, izuchenie tsitotoksicheskikh svoystv i gemoliticheskoy aktivnosti kationnykh glitserolipidov alkil'nogo tipa. [Annals of Moscow Technological University]. Vestnik Moskovskogo tekhnologicheskogo universtiteta. 2008;3:5:101-105. (In Russ.).

13. Anikina L.V., Puhov S.A., Dubrovskaja E.S., Afanas'eva S.V., Klochkov S.G. [Comparative determination of cell viability using the MTT and Resazurin]. Sravnitel'noe opredelenie zhiznesposobnosti kletok s pomoshch'yu mtt i resazurina. [Fundamental research]. Fundamental'nye issledovaniya. 2014; 12: 1423-1427. (In Russ.).

14. Aleksandrova O.I., Okolov I.N., Tahtaev Ju.V., Horol'skaja Ju.I., Hintuba T.S., Blinova M.I. [Comparative evaluation of the cytotoxicity of antimicrobial eye drops]. Sravnitel'naya otsenka tsitotoksichnosti antimikrobnykh glaznykh kapel'. [Ophthalmology journal]. Oftal'mologicheskie vedomosti. 2015;8:1:89-97. (In Russ.).

15. Aleksandrova O.I., Horol'skaja Ju.I., Majchuk D.Ju., Blinova M.I. [The study of general cytotoxicity of aminoglycoside antibiotics and fluoroquinolone in cell cultures]. Issledovanie obshchey tsitotoksichnosti antibiotikov aminoglikozidnogo i ftorkhinolonovogo ryada na kletochnykh kul'turakh. [Annals of Ophthalmology]. Vestnik oftal'mologii 2015;5:39-48. (In Russ.).

16. Aleksandrova O.I., Okolov I.N., Horol'skaja Ju.I., Blinova M.I., Churakov T.K. [Assessing the impact of benzalkonium chloride and cytotoxicity Nettatsin Tobrex eyedrops under conditions in vitro]. Otsenka vliyaniya benzalkoniya khlorida na tsitotoksichnost' glaznykh kapel' Nettatsin i Tobreks v usloviyakh in vitro. [Modern technologies in ophthalmology]. Sovremennye tekhnologii v oftal'mologii. 2016;3:163-166. (In Russ.).

17. Vechkanov E.M., Sorokina I.A. [Basics of Cell Engineering, Rostov-on-Don]. 2012. (In Russ.).

18. Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assay. J. Immunol. Meth. 1983;65:1–2:55–63.

19. Cancer cell culture: methods and protocols / Ser. Methods in Molecular Medicine. (Ed. S.P. Langdon). Totowa, NJ: Humana Press, 2003; 88:165-169.

20. In vitro toxicity testing protocols / Ser. Methods in Molecular Biology. Vol. 43. (Eds S.O’Hare, C.K. Atterwill). Totowa, NJ: Humana Press, 1995;43:138–149.


Для цитирования:


Александрова О.И., Околов И.Н., Хорольская Ю.И., Панова И.Е., Блинова М.И. Оценка цитотоксичности слезозаместительных препаратов с использованием системы in vitro. Офтальмология. 2017;14(1):59-66. https://doi.org/10.18008/1816-5095-2017-1-59-66

For citation:


Aleksandrova O.I., Okolov I.N., Khorolskaya Y.I., Panovа I.E., Blinova M.I. Cytotoxicity Evaluation of Tear Substitutes Using in vitro System. Ophthalmology in Russia. 2017;14(1):59-66. (In Russ.) https://doi.org/10.18008/1816-5095-2017-1-59-66

Просмотров: 5575


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 1816-5095 (Print)
ISSN 2500-0845 (Online)