Preview

Офтальмология

Расширенный поиск

ВЛИЯНИЕ НЕСТЕРОИДНЫХ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ГЛАЗНЫХ КАПЕЛЬ НА КЛЕТКИ ЭПИТЕЛИЯ РОГОВИЦЫ И КОНЪЮНКТИВЫ ЧЕЛОВЕКА В УСЛОВИЯХ IN VITRO

https://doi.org/10.18008/1816-5095-2017-3-251-259

Полный текст:

Аннотация

Цель: Изучить влияние глазных капель из группы НПВС с различными консервантами на жизнеспособность эпителиальных клеток глаза человека в условиях in vitro. Материалы и методы. Объектом исследования явились четыре препарата: Брокси- нак®, Акьюлар ЛС®, Дикло-Ф®, Индоколлир®. В качестве тест-систем были использованы постоянные трансформированные клеточные линии конъюнктивы (Chang Conjunctiva, Clone 1-5c-4) и роговицы (HCEC) человека. Цитотоксичность капель НПВС оценивали по морфологии и функциональной активности клеток методами фазово-контрастной микроскопии (ФКМ), МТТ-теста и клеточного анализа в режиме реального времени с использованием системы xCELLigence. Результаты. С помощью МТТ-теста было установлено, что клетки линии HCEC более чувствительны к цитотоксическому действию исследуемых препаратов, чем клетки линии Chang Conjunctiva, Clone 1-5с-4. У клеток конъюнктивы метаболическая активность в присутствии препаратов Акьюлар® и Броксинак® была в три раза ниже, чем в контроле; в присутствии препаратов Индоколлир® и Дикло-Ф® — в 20 раз ниже, чем в контроле. Метаболическая активность у клеток роговицы в присутствии препаратов Акьюлар® и Броксинак® была в четыре раза ниже, чем в контроле; в присутствии же препаратов Индоколлир® и Дикло-Ф® жизнеспособных клеток не выявлено. Препараты Индоколлир® и Дикло-Ф® оказали очень высокое токсическое действие на оба типа клеток. Результаты клеточного анализа xCELLIgence для обоих типов клеток согласуются с результатами МТТ-теста и прижизненного наблюдения за клетками методом ФКМ. Заключение. На основании полученных данных цитотоксический потенциал глазных капель из группы НПВС представлен следующим образом (по уменьшению токсичности): Индоколлир® = Дикло-Ф® > Акъюлар® = Броксинак®

Об авторах

О. И. Александрова
ФГБУН институт цитологии РАН, Санкт-Петербург
Россия
младший научный сотрудник, отдел клеточных культур, лаборатория биологии клетки в культуре, группа клеточной биотехнологии; Тихорецкий пр. 4, Санкт-Петербург, 194064, Российская Федерация


И. Н. Околов
Санкт-Петербургский филиал ФГАУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова МЗ РФ
Россия
к.м.н., заведующий клинико-бактериологической лабораторией; ул. Я.Гашека, 21, Санкт-Петербург, 192283, Российская Федерация


Ю. И. Хорольская
ФГБУН институт цитологии РАН, Санкт-Петербург
Россия
лаборант-исследователь, отдел клеточных культур, лаборатория биологии клетки в культуре, группа клеточной биотехнологии; Тихорецкий пр. 4, Санкт-Петербург, 194064, Российская Федерация


И. Е. Панова
Санкт-Петербургский филиал ФГАУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова МЗ РФ
Россия
доктор медицинских наук, профессор, зам. директора по научной работе; ул. Я.Гашека, 21, Санкт-Петербург, 192283, Российская Федерация


М. И. Блинова
ФГБУН институт цитологии РАН, Санкт-Петербург
Россия
кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник, отдел клеточных культур, лаборатория биологии клетки в культуре, группа клеточной биотехнологии; Тихорецкий пр. 4, Санкт-Петербург, 194064, Российская Федерация


Список литературы

1. Chan C., Lam D. The comparison of efficacies of topical corticosteroids and nonsteroidal anti-inflammatory drops on dry eye patients: a clinical and immunocytochemical study. Am J Ophthalmol. 2004;137:1157-1158. DOI: 10.1016/j.ajo.2004.01.038

2. Lee J., Jung W., Choi Y., Kim Y. The effects of steroids and nonsteroidal antiinflammatory agents on proliferation of human ocular fibroblast. J Korean Ophthalmol Soc. 1999;40:1496-1502.

3. Yülek F., Ozdek S., Gürelik G., Hasanreisoğlu B. Effect of topical steroids on corneal epithelial healing after vitreoretinal surgery. Acta Ophthalmol Scand. 2006;84:319322. DOI: 10.1111/j.1600-0420.2005.00632.x

4. Nowak J. Non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) in ophthalmology: pharmacological and clinical characteristics. Mil Pharm Med. 2012;5:4:33-50.

5. Иошин И.Э., Хачатрян Г.Т., Артамонова А.В., Молчанова Е.А. Нестероид ные противовоспалительные средства в коррекции послеоперационно го периода при рефракционной хирургии. [Ioshin I. E., Khachatryan G. T., Artamonova A. V., Molchanova E. A. Non-steroidal anti-inflammatory drugs in correction the postoperative period in refractive surgery Cataract & Refractive Surgery=Kataraktal’naja i refrakcionnaja hirurgija. 2013;13;3;24-30. (In Russ.)].

6. Shorstein N., Liu L., Waxman M., Herrinton L. Comparative effectiveness of three prophylactic strategies to prevent clinical macular edema following phacoe mulsification surgery. Ophthalmology. 2015;122:12.2450-2456. DOI: 10.1016/j. ophtha.2015.08.024

7. Dehar N., Gupta A., Singh G. Comparative study of the ocular efficacy and safety of diclofenac sodium (0.1%) ophthalmic solution with that of ketorolac tromethamine (0.5%) ophthalmic solution in patients with acute seasonal allergic conjunctivitis. International Journal of Applied and Basic Medical Research. 2012;2:1:25-30. DOI:10.4103/2229-516X.96799.

8. Razmju H., Khalilian A., Peyman A., Abtahi S., Abtahi M., Akbari M., Sadri L. Preoperative Topical Diclofenac and Ketorolac in Prevention of Pain and Discomfort Following Photorefractive Keratectomy: A Randomized Doublemasked Placebo-controlled Clinical Trial. International Journal of Preventive Medicine. 2012;3:l1:199-206.

9. Ayaki M., Taguchi Y., Soda M., Yaguchi S., Iwasawa A., Koide R. Cytotoxicity of topical medications used for infection and inflammation control after cataract surgery in cultured corneal endothelial cells. Biocontrol Sci. 2010;15:3:97–102.

10. Naumann U., Durka S., Weller M. Dexamethasone-mediated protection from drug cytotoxicity: association with p21 WAF1/CIP1 protein accumulation? Oncogene. 1998;17:12:1567–1575.

11. Ayaki M., Iwasawa A. Critical concentration of benzalkonium chloride in eye drop for toxicity in cultured ocular surface cell lines [abstract]. Investigative Ophthalmology and Visual Science. 2011;52:1955.

12. Pauly A., Brasnu E., Riancho L., Brignole-Baudouin F., Baudouin C. Multiple endpoint analysis of BAC-preserved and unpreserved antiallergic eye drops on a 3D-reconstituted corneal epithelial model. Mol Vis. 2010;17:745–755.

13. Domagk G. Eine neue Klasse von Desinfectionsmitteln. Deutsche Medizin Wissenschafter. 1935;61:829–832.

14. Baudouin C. Detrimental effect of preservatives in eyedrops: implications for the treatment of glaucoma. Acta Ophthalmol. 2008; 86:16-726. DOI: 10.1111/j.17553768.2008.01250.x

15. De Saint Jean., Brignole F., Bringuier A., Bauchet A., Feldmann G., Baudouin C. Effects of benzalkonium chloride on growth and survival of Chang conjunctival cells. Invest Ophthalmol Vis Sci. 1999;40:3:619–630.

16. Ichijima H., Petroll W., Jester J., Cavanagh H. Confocal microscopic studies of living rabbit cornea treated with benzalkonium chloride. Cornea. 1992;11:221-225.

17. Pauly A., Meloni M., Brignole-Baudouin F., Warnet J.M., Baudouin C. Multiple endpoint analysis of the 3D-reconstituted corneal epithelium after treatment with benzalkonium chloride: early detection of toxic damage. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2009;50:1644-1652. DOI: 10.1167/iovs.08-2992

18. Fisher A. Allergic reactions to merthiolate (thimerosal). Cutis. 1981; 27:6:580: 582:587.

19. Sertoli A., Di Fonzo, Spallanzani P., Panconesi E. Allergic contact dermatitis from thimerosal in a soft contact lens wearer. Contact Dermatitis. 1980;6:4:292-293.

20. Therapeutic Class Review Ophthalmic Nonsteroidal Anti-Inflammatory Drugs at: http://one.aao.org/CE/PracticeGuidelines/PPP_Content.aspx?cid=0f20807f-bc614f11-b570-01ae26990edb

21. Данченко Е.О. Оценка цитотоксичности фармацевтических субстанций с ис пользованием клеточных культур. [Danchenko E.O. Evaluation of cytotoxicity of pharmaceutical substances using cell cultures. Immunopathology, allergology, infectology=Immunopatologija, Allergologija, Infektologija. 2012;2:22-31(In Russ.)]

22. Еропкин М.Ю., Еропкина Е.М. Клеточные культуры как модельная систе ма исследования токсичности и скрининга цитопротекторных препаратов. СПб.: Морсар, 2003. [Eropkin M.Ju., Eropkina E.M. The cell cultures as a model system toxicity studies and screening of cytoprotective drugs. SPb.: Morsar AV, 2003. (In Russ.)].

23. Аникина Л.В., Пухов С.А., Дубровская Е.С., Афанасьева С.В., Клочков С.Г. Сравнительное определение жизнеспособности клеток с помощью МТТ и ресазурина. 2014;12:1423-1427. [Anikina L.V., Puhov S.A., Dubrovskaja E.S., Afanas’eva S.V., Klochkov S.G. Comparative determination of cell viability using the MTT and Resazurin. Fundamental research=Fundamental’nye issledovaniya. 2014;12:1423-1427. (In Russ.).]

24. Александрова О.И., Околов И.Н., Тахтаев Ю.В., Хорольская Ю.И., Хинтуба Т.С., Блинова М.И. Сравнительная оценка цитотоксичности антимикроб ных глазных капель. 2015;8:1:89-97. [Aleksandrova O.I., Okolov I.N., Tahtaev Ju.V., Horol’skaja Ju.I., Hintuba T.S.,Blinova M.I. Comparative evaluation of the cytotoxicity of antimicrobial eye drops. Ophthalmology journal=Oftal’mologicheskie vedomosti. 2015;8:1:89-97. (In Russ.)].

25. Александрова О.И., Хорольская Ю.И., Майчук Д.Ю., Блинова М.И. Иссле дование общей цитотоксичности антибиотиков аминогликозидного и флю орохинолонового ряда на клеточных культурах. 2015;5:39-48. [Aleksandrova O.I., Horol’skaja Ju.I., Majchuk D.Ju., Blinova M.I. The study of general cytotoxicity of aminoglycoside antibiotics and fluoroquinolone in cell cultures. Annals of Ophthalmology=Vestnik oftal’mologii 2015;5:39-48. (In Russ.).] DOI: 10.17116/ oftalma2015131543-53

26. Александрова О.И., Околов И.Н., Хорольская Ю.И., Блинова М.И., Чураков Т.А. Оценка влияния бензалкония хлорид на цитотоксичность глазных ка пель неттацин и тобрекс в условиях in vitro. 2016;3:163-166. [Aleksandrova O.I., Okolov I.N., Horol’skaja Ju.I., Blinova M.I., Churakov T.K. Assessing the impact of benzalkonium chloride and cytotoxicity Nettatsin Tobrex eyedrops under conditions in vitro. [Modern technologies in ophthalmology=Sovremennye tekhnologii v oftal’mologii. 2016;3:163-166. (In Russ.).]

27. Александрова О.И., Околов И.Н., Хорольская Ю.И., Панова И.Е., Блино ва М.И. Оценка цитотоксичности слезозаместительных препаратов с ис пользованием системы in vitro. 2017;14(1):59–66. [Aleksandrova O.I., Okolov I.N., Horol’skaja Ju.I., Panova I.E., Blinova M.I. Cytotoxicity Evaluation of Tear Substitutes Using in vitro System. Ophthalmology in Russia=Oftal’mologija. 2017;14(1):59–66. (In Russ.).] DOI: 10.18008/1816-5095-2017-1-59-66.

28. Cancer cell culture: methods and protocols / Ser. Methods in Molecular Medicine. (Ed. S.P. Langdon). Totowa, NJ: Humana Press, 2003;88:165-169.

29. In vitro toxicity testing protocols / Ser. Methods in Molecular Biology. (Eds S.O’Hare, C.K. Atterwill). Totowa, NJ: Humana Press, 1995;43:138–149.

30. Urcan E., Haertel U., Styllou M., Hickel R., Scherthan H., Reichl F. Real-time xCELLigence impedance analysis of the cytotoxicity of dental composite components on human gingival fibroblasts. Dent Mater. 2010;26:1:51-58. DOI: 10.1016/j.dental.2009.08.007.


Для цитирования:


Александрова О.И., Околов И.Н., Хорольская Ю.И., Панова И.Е., Блинова М.И. ВЛИЯНИЕ НЕСТЕРОИДНЫХ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ГЛАЗНЫХ КАПЕЛЬ НА КЛЕТКИ ЭПИТЕЛИЯ РОГОВИЦЫ И КОНЪЮНКТИВЫ ЧЕЛОВЕКА В УСЛОВИЯХ IN VITRO. Офтальмология. 2017;14(3):251-259. https://doi.org/10.18008/1816-5095-2017-3-251-259

For citation:


Aleksandrova O.I., Okolov I.N., Khorolskaya Y.I., Panovа I.E., Blinova M.I. INFLUENCE OF NON-STEROIDAL ANTI-INFLAMMATORY EYE DROPS ON THE EPITHELIUM CELLS OF THE CORNEA AND CONJUNCTIVA IN VITRO. Ophthalmology in Russia. 2017;14(3):251-259. (In Russ.) https://doi.org/10.18008/1816-5095-2017-3-251-259

Просмотров: 243


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 1816-5095 (Print)
ISSN 2500-0845 (Online)